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PCR仪的一些相关知识介绍

时间:2020-11-14      浏览次数:1231
  PCR是聚合酶链反应的简称,是在短时间内体外大量扩增特定的DNA片段的分子生物学技术。自动完成聚合酶链反应,提供DNA扩增的温度条件而设计的仪器称为PCR仪。
  
  PCR仪主要用于DNA片段的放大,可将DNA分子或某一DNA片段于数小时内扩增至十万乃至百万倍,在这过程中主要是3个特征温度循环:
  
  1、高温变性:把样品加热至90~95℃让DNA模板变性变成单链。
  
  2、低温退火:让样品的温度迅速下降至50~65℃,引物就可以结合到模板上去。
  
  3、适温延伸:让样品的温度上升至70~75℃,DNA聚合酶就可以从引物开始用底物复制出新链。
  
  因此,在PCR反应过程中对温度控制的要求很高,良好的温度控制是PCR仪质量好坏的关键。
  
  基因扩增的基本要素:
  
  1、DNA模板:待拷贝的DNA称为模板,它可以是双链DNA也可是单链DNA,Z后扩增得到的产物是双链状态的。
  
  2、引物:是DNA复制的先锋,就象结晶过程中的晶核,引导DNA的合成。在PCR扩增中一般使用合成的寡核苷酸作引物。
  
  3、DNA聚合酶(TaqDNA聚合酶):是DNA复制的动力,在dNTP等底物存在时在引物的引导下沿着模板DNA合成互补的DNA链。
  
  4、缓冲液:提供DNA合成反应所需的pH,离子强度等环境。
  
  5、4种单核苷酸:dNTP,提供DNA合成原料。
  
  PCR仪用途:
  
  1、医学和健康检验机构临床诊断,用于判断检体中是否会表现某遗传疾病的图谱、传染病的诊断以及基因复制。
  
  2、DNA鉴定,常见于司法鉴定领域。
  
  3、临床分子诊断试剂和生物试剂公司药品研发。
  
  4、转基因、微生物、动物源性成分检测,常见于医药卫生及农产品检验领域。
  
  2、引物:是DNA复制的先锋,就象结晶过程中的晶核,引导DNA的合成。在PCR扩增中一般使用合成的寡核苷酸作引物。
  
  3、DNA聚合酶(TaqDNA聚合酶):是DNA复制的动力,在dNTP等底物存在时在引物的引导下沿着模板DNA合成互补的DNA链。
  
  4、缓冲液:提供DNA合成反应所需的pH,离子强度等环境。
  
  5、4种单核苷酸:dNTP,提供DNA合成原料。

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