PCR基因扩增仪采用专有的技术,有效避免了热传导的边缘效应问题,为PCR实验提供温度均一性,确保实验结果的可靠性和重复性,温控系统,模式显示金属模块的温度变化,能模拟试管内试剂的温度变化,甚至考虑到了PCR反应体系对温度变化的影响,模块具有温度梯度功能,为前沿科研工作者提供30℃的温度梯度范围,满足苛刻的优化实验需求。
PCR技术的本质是体外核酸扩增,加热使双链DNA解开螺旋,在退火温度条件下引物同模板DNA杂交,在TaqDNA聚合酶,dNTPs,Mg2+和合适pH缓冲液存在条件下延伸引物,重复“变性→退火→引物延伸”过程至25~40个循环,呈指数级扩大待测样本中的核酸拷贝数。PCR扩增时加入的引物利用荧光素进行标记,使引物和荧光探针同时与模板进行特异性结合,扩增结果通过荧光信号采集系统实时采集信号并输送到计算机分析处理系统,实时输出量化结果,这样的PCR仪叫实时荧光定量PCR仪。
PCR基因扩增仪不仅拥有30℃的宽限梯度功能,可用来优化实验条件,满足苛刻的实验需求,同时延续了“USB”和联机联网功能,在之前基础上,增加了LCD彩色触摸屏,使实验的显示和操作更为清晰和直接。
PCR基因扩增仪的PCR由变性、退火、延伸三个基本反应步骤构成。
1.模板DNA的变性:模板DNA经加热至93℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备;
2.模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;
3.引物的延伸:DNA模板-引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链重复循环变性、退火、延伸三过程,就可获得更多的“半保留复制链”,而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2~4分钟,2~3小时就能将待扩增的目的基因扩增放大几百万倍。