进口荧光显微镜是以紫外线为光源,用以照射被检物体,使之发出荧光,然后在显微镜下观察物体的形状及其所在位置。
进口荧光显微镜用于研究细胞内物质的吸收、运输、化学物质的分布及定位等。
进口荧光显微镜和普通显微镜有以下的区别:1.照明方式通常为落射式,即光源通过物镜投射于样品上;2.光源为紫外光,波长较短,分辨力高于普通显微镜;3.有两个特殊的滤光片,光源前的用以滤除可见光,目镜和物镜之间的用于滤除紫外线,用以保护人目。
进口荧光显微镜标本制作要求
(一)载玻片载玻片厚度应在0.8~1.2mm之间,太厚的坡片,一方面光吸收多,另一方面不能使激发光在标本上聚集。载玻片必须光洁,厚度均匀,无明显自发荧光。有时需用石英玻璃载玻片。
(二)盖玻片盖玻片厚度在0.17mm左右,光洁。为了加强激发光,也可用干涉盖玻片,这是一种特制的表面镀有若干层对不同波长的光起不同干涉作用的物质(如氟化镁)的盖玻片,它可以使荧光顺利通过,而反射激发光,这种反射的激发光女可激发标本。
(三)标本组织切片或其他标本不能太厚,如太厚激发光大部分消耗在标本下部,而物镜直接观察到的上部不充分激发。另外,细胞重迭或杂质掩盖,影响判定。
(四)封裱剂封裱剂常用甘油,必须无自发荧光,无色透明,荧光的亮度在pH8.5~9.5时较亮,不易很快褪往。所以,常用甘油和0.5mol/lpH9.0~9.5的碳酸盐缓冲液的等量混合液作封裱剂。
(五)镜油一般暗视野荧光显微镜和用油镜观察标本时,必须使用镜油,使用特制的无荧光镜油,也可用上述甘油代替,液体石蜡也可用,只是折光率较低,对图像质量略有影响。